支原體(mycoplasma):又稱(chēng)霉形體,為目前發(fā)現(xiàn)的最小的最簡(jiǎn)單的原核生物,估計(jì)有15%~35%的細(xì)胞被支原體污染。支原體污染會(huì)對(duì)細(xì)胞造成多方面的影響,包括代謝、免疫或生化特性、生長(zhǎng)狀況、以及細(xì)胞存活等多方面的改變,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性、可靠性和準(zhǔn)確性;支原體難以檢測(cè),同時(shí)也很難消除,其能輕易地通過(guò)0.22μm標(biāo)準(zhǔn)濾膜,同時(shí)也能拮抗絕大多數(shù)的抗生素,給細(xì)胞培養(yǎng)造成巨大損失。因此細(xì)胞都需要定期(如每2~3個(gè)月)進(jìn)行支原體污染的檢測(cè)。許多方法可用于檢測(cè)支原體,包括肉湯或瓊脂培養(yǎng),直接或間接的熒光染色、ELISA、直接或間接的PCR法等,其中,直接PCR法靈敏度高。 為保證PCR結(jié)果的準(zhǔn)確性,要預(yù)防非特異性PCR擴(kuò)增和污染,常用的措施是采用熱啟動(dòng)Taq酶和UDG (尿嘧啶-DNA 糖基化酶)。 化學(xué)修飾Taq酶活性中心被封閉,使得該酶在低溫或常溫沒(méi)有活性,因此在加樣至PCR擴(kuò)增前,不會(huì)產(chǎn)生由于引物錯(cuò)誤配對(duì)而形成的非特異性擴(kuò)增。高溫(如95℃)條件下,化學(xué)修飾基團(tuán)會(huì)水解脫落,釋放全部酶活性,從而實(shí)現(xiàn)Taq酶的熱啟動(dòng)。最大程度降低非特異擴(kuò)增和引物二聚體的形成,提高擴(kuò)增靈敏度和特異性。 UDG (尿嘧啶-DNA 糖基化酶)能選擇性水解斷裂含有dU的單鏈或雙鏈 DNA中的尿嘧啶糖苷鍵,形成有缺失堿基的DNA鏈,在堿性條件及高溫下會(huì)進(jìn)一步水解斷裂,從而被消除。本產(chǎn)品選擇UDG酶,最佳活性溫度為50℃,95℃滅活。 本產(chǎn)品含有化學(xué)修飾熱啟動(dòng)酶的2×PCR mix,配以dUTP和UDG酶,可最大程度降低非特異擴(kuò)增和引物二聚體的形成,有效防止PCR產(chǎn)物的交叉污染。同時(shí)在PCR管中預(yù)先加入上樣Loading Dye成份,使PCR前加樣處理及后續(xù)電泳上樣變的更方便,以達(dá)到準(zhǔn)確檢測(cè)支原體污染,重復(fù)性好,可信度高。
Components MB000-1591 MB000-1592 8-cap strips with Loading Dye 6 12 Cell lysis buffer 5 ML 5 ML×2 Control template 50μL 50μL 2×EasyHotStart UDG PCR Master Mix 0.75 ML 1.5 ML Sterial ddH2O 1.5 ML 1.5 ML 保存條件:-20℃。 有效期:一年。 運(yùn)輸條件:干冰運(yùn)輸。
本試劑盒能檢測(cè)支原體種類(lèi)包括 M. Hyorhinis, M. Arginini, M.Orale, M. Fermentans, A.laidlawii等常見(jiàn)支原體,這5種支原體代表了98%以上的細(xì)胞支原體污染。同時(shí)還能檢測(cè)Mycoplasma, Acholeplasma, Ureaplasma, Spiroplasma等種屬。
Q:OptiVitro? 無(wú)血清細(xì)胞凍存液 UC04(UC000-N056) A:無(wú)血清細(xì)胞凍存液UC04,是一款普遍適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞低溫冷凍保存的即用型細(xì)胞凍存 液,經(jīng)驗(yàn)證本品適用于外周血單核細(xì)胞(PBMC)、T 細(xì)胞、NK 細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)等多種類(lèi) 型細(xì)胞的凍存。本品無(wú)血清,無(wú)蛋白,無(wú)異源體,成分簡(jiǎn)單、明確,能夠保持多種細(xì)胞的復(fù)蘇活率可達(dá) 到 90%以上。 Q:OptiVitro?無(wú)蛋白,CD細(xì)胞凍存液(UC000-N011) A:OptiVitro 無(wú)蛋白,CD細(xì)胞凍存液(Protein-free, Chemical Defined Cell Cryopreservation Medium), 是一款普遍適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞低溫冷凍保存的即用型細(xì)胞凍存液,經(jīng)驗(yàn)證本品適用于人間充質(zhì)干 細(xì)胞(hMSC)、中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)、外周血單核細(xì)胞(PBMC)、人胚腎細(xì)胞(HEK293)、 非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero)等類(lèi)型細(xì)胞的凍存。本品化學(xué)成分明確,不含有任何蛋白成分,可排除血清或 蛋白潛在的病原體或免疫反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn),使用更安全,并能夠保持多種細(xì)胞的復(fù)蘇活率在 90%以上。 Q:OptiVitro? 無(wú)血清細(xì)胞凍存液(VUC00-N011) A:OptiVitro?無(wú)血清細(xì)胞凍存液(Serum-free Cell Cryopreservation Medium),是一款適用于多種哺乳動(dòng)物 細(xì)胞低溫冷凍保存的即用型細(xì)胞凍存液。經(jīng)驗(yàn)證本品適用于人間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSC)、中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 (CHO)、外周血單核細(xì)胞(PBMC)、人胚腎細(xì)胞(HEK293)、非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero)等類(lèi)型細(xì)胞的凍存。 本品無(wú)須進(jìn)行額外配制,使用簡(jiǎn)單,細(xì)胞凍存后復(fù)蘇的回收率和存活率高,可完美替代傳統(tǒng)的含血清凍存液。