“穿戴好手部和面部的防護用品，我們打開液氮罐，液氮氣化形成的白霧從罐體開口往下緩緩流淌。向罐體中看去，似乎能感受到接觸空氣的液氮液面正在巨大的溫差下沸騰。無數細胞就像生命的種子，在目光觸及不到的低溫液體內沉睡。我們盡可能迅速的取出早已被標記好的細胞凍存管。迅速水浴解凍后經過一系列操作，細胞就完成了從休眠狀態(tài)到活躍狀態(tài)的轉換，此后我們只能祈禱蘇醒后的細胞們能盡快恢復正常的生命活動。”
細胞凍存液的門道
細胞實驗老手們都了解，細胞冷凍講究一個“慢凍速融”。傳統(tǒng)的操作流程是將細胞用凍存液重懸后分裝到凍存管內，然后再緩慢的降溫到-80℃，而后轉入液氮罐長期保存。其中凍存液的主要功能就是防止冷凍過程中形成會損傷細胞的冰晶，同時在長期冷凍和解凍過程中為細胞提供支持成分。市面上有眾多商品化的細胞凍存液產品，而也有人在堅持使用自行配制的凍存液。細胞凍存液真的會對細胞的保存和復蘇產生重要影響嗎？事實上，使用不同的凍存液保存細胞，其結果可能大不相同。
“原始”的細胞凍存液提示了哪些信息？
如果需要凍存的細胞屬于常用的細胞系，很多實驗室會選擇自行配制凍存液來使用。典型的配方是在基礎培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO（二甲基亞砜）和5%到40%的血清。甚至有90%血清+10%DMSO的配方。DMSO是一種滲透性保護劑，能夠降低細胞冰點，減少冰晶的形成，防止冷凍過程對細胞造成不可逆的機械性損傷。血清中的白蛋白是一種關鍵的組分，可在細胞周圍形成保護層。當細胞開始解凍時，血清也可以與釋放的毒素相結合。當在營養(yǎng)豐富的環(huán)境中被凍存，細胞也往往更容易在解凍后恢復狀態(tài)。除了DMSO和血清，凍存液中通常含有的基礎培養(yǎng)基也有維持滲透壓、補充血清中含量不足的某些營養(yǎng)成分等作用。
這些成分的組合使自配的凍液具備了保護細胞免受冰晶損傷、營養(yǎng)支持和化學性保護等基本功能，使得細胞長期冷凍保存成為可能。但是，細心的你會發(fā)現(xiàn)：自行配制的凍存液用于凍存某些敏感的細胞（如干細胞等）后很難正常復蘇，甚至部分生命力旺盛的細胞系在復蘇后也會出現(xiàn)形態(tài)和增殖速度方面的問題。這會和凍存液有關嗎？
自配的凍存液有哪些潛在風險？
自配的培養(yǎng)液幾乎都會含有血清和DMSO這兩種物質。血清，我們知道它實際上是一種來自動物體內的天然復合物，其批次間差異不可能完全避免。解凍后細胞的活力可能因凍存液中血清批次的不同而有差異。相比于永生化的細胞系，原代細胞更敏感從而更容易受到這方面影響。對于多能干細胞（PSC），血清中的某些成分可能導致它們分化，并且不是朝著你期望的方向。DMSO雖然在一定條件下能保護細胞，但它本身是有毒的，同時DMSO也會改變生物膜對電解質、藥物、毒物和代謝產物的通透性。一些脆弱的細胞也會因為DMSO的存在更難以在復蘇后恢復狀態(tài)。雖然自配的凍存液相對廉價，但因為長期實驗的可靠性需求，以及凍存中的細胞庫的寶貴性，越來越多的細胞培養(yǎng)人員會更傾向于使用可靠的商品化細胞凍存液。
有沒有可靠的商品化凍存液選擇？
為了幫助更多用戶解決細胞凍存過程中的麻煩，依科賽推出了一系列化學成分明確、經過嚴密的性能驗證實驗的即用型細胞凍存液產品。
OptiVitro 無蛋白,CD細胞凍存液
Cat#UC000-N011、UC000-N021
適用于：多種哺乳動物細胞低溫冷凍保存的即用型凍存液，無外源污染風險。
二、經典款
OptiVitro 無血清細胞凍存液Cat#VUC00-N011
適用于：多種哺乳動物細胞低溫冷凍保存的即用型凍存液，普適性更強。
三、無DMSO款
OptiVitro 無DMSO細胞凍存液Cat#UC000-N031
適用于：包括多種干細胞在內的貼壁細胞凍存的即用型細胞凍存液。
產品信息
