產(chǎn)品概述
腫瘤壞死因子-α也稱惡病質素,腫瘤壞死因子-β也稱淋巴毒素,它們是兩種密切相關的蛋白質(約34%的氨基酸序列同源),這兩種蛋白質結合在相同的細胞表面受體上并表現(xiàn)出許多共同的生物學功能。當主體遭到感染或惡性腫瘤增殖的時候作為主要的免疫激活反應劑和主要的介導炎癥反應劑TNF-α和TNF-β在其中起到了關鍵的作用。TNF-α由活化巨噬細胞和其它一些細胞激活,這些細胞包括T細胞、B細胞、NK細胞、LAK細胞、星形膠質細胞、內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞和一些腫瘤細胞。大鼠TNF-αcDNA是一個235個氨基酸殘基的II型膜蛋白。通過金屬蛋白酶水解從跨膜區(qū)C端釋放出一個由156個氨基酸組成的可溶TNF-α(sTNF-α)。
產(chǎn)品原理
本實驗采用雙抗體夾心ELISA法??勾笫骉NF-α單抗包被于酶標板上,同時加入標本、標準品和生物素化的抗大鼠TNF-α抗體,標本、標準品中的TNF-α會與加入于孔中的生物素化的抗大鼠TNF-α抗體及包被于酶標板上的單抗結合,形成免疫復合物,游離的成分被洗去;加入辣根過氧化物酶標記的親合素,親合素與生物素特異性結合,游離的成分被洗去。加入顯色底物(顯色劑),若反應孔中有TNF-α,辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑變藍,加終止液變黃。在450nm處測OD值,TNF-α濃度與OD450值之間呈正相關,可通過繪制標準曲線求出標本中TNF-α濃度。
產(chǎn)品性能
1. 靈敏度:最小可測大鼠TNF-α達15pg/ml。
2. 重復性:板內(nèi)、 板間變異系數(shù)均<10%。
產(chǎn)品組分及儲存條件
名稱
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96 Tests
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48 Tests
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保存條件
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1. 抗體包被板條 (Microwell Plate)
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8×12
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8×6
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2-8℃
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2.標準品 (Standard)
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2 支(凍干)
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1 支(凍干)
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2-8℃
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3.濃縮生物素化抗體 100× (Biotin-Conjugate)
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2 支 (30μl/支)
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1 支(30μl/支)
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2-8℃
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4.濃縮酶結合物 100× (Streptavidin-HRP)
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2 支 (60μl/支)
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1 支(60μl/支)
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2-8℃(避光)
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5.試劑稀釋液 (Assay Diluent)
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2 瓶(25ml/瓶)
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1 瓶(25ml/瓶)
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2-8℃
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6.濃縮洗滌液 20× (Wash Buffer Concentrate)
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1 瓶 (30ml/瓶)
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1 瓶(30ml/瓶)
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2-8℃
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7.顯色劑 (Substrate Solution)
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1 瓶(12ml/瓶 )
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1 瓶(6ml/瓶)
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2-8℃(避光)
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8.終止液 (Stop Solution)
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1 瓶(12ml/瓶)
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1 瓶(12ml/瓶)
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2-8℃
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9.封板膠紙
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2 張
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2 張
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10.說明書
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1 份
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1 份
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試驗所需自備儀器和試劑:
1. 酶標儀(450nm檢測波長濾光片,570nm或630nm校正波長濾光片)。
2. 高精度加液器及一次性吸頭:0.5-10μl,2-20μl,20-200μl,200-1000μl。
3. 微孔板振蕩器、蒸餾水或去離子水、坐標紙。
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